在ELISA實(shí)驗(yàn)操作中,加樣是重要的一項(xiàng)步驟,這一步驟在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中都有著很大的影響。今天小編針對(duì)這一問(wèn)題作出整理。
一、加樣問(wèn)題的可能原因
1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2.手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));
3.加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
二、解決方法
1.標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2.加樣后及時(shí)放入孵箱。
3.加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4.如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5.標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。

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