土壤磷酸二酯酶活性(熒光法)試劑盒微量法/48樣
測定原理
需自備的儀器和用品
試劑組成和配制
測定意義
土壤磷酸二酯酶是在土壤磷酸單酯酶之后的第二大磷酸酶,在土壤有機磷的循環代謝中起到重要作用。
測定原理
MUF在 355 nm波長處激發, 能在 450 nm處檢測到熒光, 它與某些物 質結合后熒光特性消失, 通過酶的水解作用MUF釋放出來, 通過檢測熒光量來表征酶活性。
需自備的儀器和用品
酶標儀、臺式離心機、恒溫培養箱、可調式移液器、黑色96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制
試劑一:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃避光保存(臨用前加入0.24mL試劑三溶解后加入11.76mL蒸餾水混勻);
試劑三:液體8mL×1瓶 ,常溫避光保存;
標準品:粉劑×1瓶,-20℃避光保存。
注意
預實驗的意義
注意
正式測定前務必取 3 - 5 個預期差異較大的樣本做預測定。
預實驗的意義
比色法檢測試劑盒預實驗非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測,以免造成試劑盒和樣本的浪費(比如低表達處理的樣本);
2、熟悉生化試劑盒的操作流程,尤其是初次使用生化試劑盒測定;
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數是否合適;
4、了解實驗過程中可能出現的實驗現象或問題,以便于及時作出調整;
5、通過3 - 5組預實驗,判斷試劑盒對于樣本的最佳適應稀釋濃度范圍,指導實驗樣本稀釋比例。
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