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谷胱甘肽過氧化物酶(GPX,GSH-Px)活性試劑盒分光光度法/24樣
測定原理
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
試劑盒組分與配制
測定意義
GSH-Px是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)中催化還原型谷胱甘肽（GSH）氧化的主要酶之一。GSH-Px不僅能夠特異地催化還原型谷胱甘肽與ROS反應(yīng)，生成氧化型谷胱甘肽GSSG，從而保護(hù)生物膜免受ROS的損害，維持細(xì)胞的正常功能；而且具有保護(hù)肝臟、提高機(jī)體免疫力、拮抗有害金屬離子對機(jī)體的傷害和增加機(jī)體抗輻射等能力。
測定原理
GSH-Px活性以催化GSH氧化的反應(yīng)速度，及單位時(shí)間內(nèi)GSH減少的量來表示，GSH和DTNB反應(yīng)在GSH-Px催化下可生成黃色產(chǎn)物，于412nm下有最大吸收峰，反應(yīng)液黃色越淺，GSH-Px活性越高，反應(yīng)液黃色越深，GSH-Px活性越低。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
紫外分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、研缽、可調(diào)節(jié)移液器、1mL石英比色皿和蒸餾水。
試劑盒組分與配制
提取液：液體30 mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加入10mL蒸餾水溶解。
試劑二：液體10mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：液體30mL×1瓶，4℃保存。
試劑五：粉劑×1瓶，-20℃避光保存。臨用前加入6mL蒸餾水。
標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加入10mL蒸餾水溶解即為1μmol/mL GSH。
注意
注意
正式測定前務(wù)必取 3 - 5 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
比色法檢測試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測，以免造成試劑盒和樣本的浪費(fèi)（比如低表達(dá)處理的樣本）；
2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測定；
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；
4、了解實(shí)驗(yàn)過程中可能出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或問題，以便于及時(shí)作出調(diào)整；
5、通過3 - 5組預(yù)實(shí)驗(yàn)，判斷試劑盒對于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍，指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)樣本稀釋比例。
